Semua konten iLive ditinjau secara medis atau diperiksa fakta untuk memastikan akurasi faktual sebanyak mungkin.
Kami memiliki panduan sumber yang ketat dan hanya menautkan ke situs media terkemuka, lembaga penelitian akademik, dan, jika mungkin, studi yang ditinjau secara medis oleh rekan sejawat. Perhatikan bahwa angka dalam tanda kurung ([1], [2], dll.) Adalah tautan yang dapat diklik untuk studi ini.
Jika Anda merasa salah satu konten kami tidak akurat, ketinggalan zaman, atau dipertanyakan, pilih dan tekan Ctrl + Enter.
Analisis polimorfisme panjang fragmen pembatasan
Ahli medis artikel
Terakhir ditinjau: 05.07.2025
Penggunaan berbagai endonuklease restriksi secara luas untuk analisis DNA kromosom telah mengungkap variabilitas genom manusia yang sangat besar. Bahkan perubahan kecil pada daerah pengkodean dan pengaturan gen struktural dapat menyebabkan penghentian sintesis protein tertentu atau hilangnya fungsinya dalam tubuh manusia, yang biasanya memengaruhi fenotipe pasien. Namun, sekitar 90% genom manusia terdiri dari sekuens non-pengkodean, yang lebih bervariasi dan mengandung banyak yang disebut mutasi netral, atau polimorfisme, dan tidak memiliki ekspresi fenotipik. Daerah polimorfik (lokus) tersebut digunakan dalam diagnosis penyakit keturunan sebagai penanda genetik. Lokus polimorfik terdapat di semua kromosom dan terkait dengan daerah gen tertentu. Dengan menentukan lokalisasi lokus polimorfik, dimungkinkan untuk menetapkan gen mana yang terkait dengan mutasi yang menyebabkan penyakit pada pasien.
Untuk mengisolasi daerah DNA polimorfik, digunakan enzim bakteri - restriksi, yang produknya adalah situs restriksi. Mutasi spontan yang terjadi pada situs polimorfik membuat mereka resistan atau, sebaliknya, sensitif terhadap aksi restriksi tertentu.
Variabilitas mutasional pada situs restriksi dapat dideteksi dengan mengubah panjang fragmen restriksi DNA dengan memisahkannya menggunakan elektroforesis dan hibridisasi berikutnya dengan probe DNA spesifik. Jika tidak ada restriksi pada situs polimorfik, satu fragmen besar akan terdeteksi pada elektroforegram, dan jika ada, fragmen yang lebih kecil akan hadir. Ada atau tidaknya situs restriksi pada lokus identik kromosom homolog memungkinkan pelabelan gen mutan dan normal yang cukup andal dan melacak transmisinya ke keturunan. Jadi, ketika mempelajari DNA pasien di kedua kromosom yang memiliki situs restriksi di daerah polimorfik, fragmen DNA pendek akan terdeteksi pada elektroforegram. Pada pasien homozigot untuk mutasi yang mengubah situs restriksi polimorfik, fragmen yang lebih panjang akan terdeteksi, dan pada pasien heterozigot, fragmen pendek dan panjang.
[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]