Imunoelektroforesis protein darah

Paraprotein biasanya tidak ada dalam serum darah.

Imunoglobulinopati, atau gammopati, mencakup sekelompok besar kondisi patologis yang ditandai dengan hipergammaglobulinemia poliklonal atau monoklonal. Imunoglobulin terdiri dari dua rantai berat (H) (berat molekul 50.000) dan dua rantai ringan (L) (berat molekul 25.000). Rantai tersebut dihubungkan oleh jembatan disulfida dan terdiri dari struktur yang disebut domain (domain H - 4, L - 2). Di bawah aksi enzim proteolitik, Ig dibagi menjadi fragmen: fragmen Fc dan fragmen Fab. Rantai berat Ig manusia diwakili oleh lima varian struktural, yang diberi nama dengan huruf alfabet Yunani: γ, α, μ, δ, ε. Mereka sesuai dengan 5 kelas Ig - G, A, M, D, E. Rantai ringan diwakili oleh dua varian yang berbeda secara struktural: κ (kappa) dan λ (lambda), yang sesuai dengan dua jenis Ig dari setiap kelas. Dalam setiap molekul Ig, baik rantai berat maupun rantai ringan identik. Semua orang biasanya memiliki Ig dari semua kelas dan kedua jenis, tetapi kandungan relatifnya tidak sama. Rasio molekul κ dan λ dalam kelas Ig yang berbeda juga tidak sama. Deteksi gangguan pada rasio Ig atau fragmennya memainkan peran penting dalam diagnosis imunoglobulinopati monoklonal.

Imunoglobulinopati monoklonal (paraproteinemia) adalah sindrom yang bermanifestasi dalam akumulasi Ig atau fragmennya yang homogen dalam semua parameter fisikokimia dan biologis dalam serum darah dan/atau urin pasien. Ig monoklonal (paraprotein, protein-M) adalah produk sekresi satu klon limfosit B (sel plasma), oleh karena itu mereka mewakili kumpulan molekul yang secara struktural homogen dengan rantai berat dari satu kelas (subkelas), rantai ringan dari satu jenis dan daerah variabel dari struktur yang sama. Imunoglobulinopati monoklonal biasanya dibagi menjadi jinak dan ganas. Dalam bentuk jinak gammopati monoklonal, proliferasi sel plasma dikendalikan (mungkin oleh sistem imun) sedemikian rupa sehingga gejala klinis tidak ada. Dalam bentuk ganas, terjadi proliferasi sel limfoid atau plasma yang tidak terkendali, yang menentukan gambaran klinis penyakit.

Klasifikasi imunoglobulinopati monoklonal

Kategori gammopati onoklonal	Sifat patologi	Konsentrasi Ig patologis dalam serum darah, g/l
Keganasan sel B	Mieloma multipel, makroglobulinemia Waldenstrom	Lebih dari 25
	Plasmacytoma (soliter - tulang dan ekstrameduler), limfoma, leukemia limfositik kronis, penyakit rantai berat	Jauh di bawah 25
sel B jinak	Gammopati monoklonal yang tidak diketahui asal usulnya	Di bawah 25
Keadaan imunodefisiensi dengan ketidakseimbangan tautan T dan B pada sistem imun	Primer (Wiskott-Aldrich, DiGeorge, Neselef, sindrom imunodefisiensi gabungan yang parah)	Di bawah 25
	Sekunder (berkaitan dengan usia, disebabkan oleh penggunaan imunosupresan, terkait dengan penyakit onkologi non-limfoid (misalnya, kanker usus besar, kanker payudara, kanker prostat, dll.)	Di bawah 2,5
Keadaan imunodefisiensi dengan ketidakseimbangan tautan T dan B pada sistem imun	Restrukturisasi sistem imun setelah transplantasi sumsum tulang merah	Di bawah 25
	Stimulasi antigenik pada ontogenesis awal (infeksi intrauterin)	Di bawah 25
Respon imun homogen	Infeksi bakteri	Di bawah 25
	Penyakit autoimun seperti krioglobulinemia, SLE, artritis reumatoid, dll.	Di bawah 25

Imunoelektroforesis protein serum darah memungkinkan untuk mendeteksi rantai monoklonal (patologis) IgA, IgM, IgG, H dan L, paraprotein. Selama elektroforesis konvensional, Ig normal, yang sifatnya heterogen, terletak di zona γ, membentuk dataran tinggi atau pita lebar. Ig monoklonal, karena homogenitasnya, bermigrasi terutama ke zona γ, kadang-kadang ke zona β dan bahkan ke daerah α, di mana mereka membentuk puncak tinggi atau pita yang dibatasi dengan jelas (gradien M).

Mieloma multipel (penyakit Rustitsky-Kahler) merupakan hemoblastosis paraproteinemik yang paling umum; penyakit ini terdeteksi tidak kurang sering daripada leukemia mielo- dan limfositik kronis, limfogranulomatosis, dan leukemia akut. Kelas dan jenis Ig patologis yang disekresikan oleh mieloma menentukan varian imunokimia penyakit tersebut. Frekuensi kelas dan jenis Ig patologis pada mieloma umumnya berkorelasi dengan rasio kelas dan jenis Ig normal pada orang sehat.

Seiring dengan peningkatan kandungan Ig patologis dalam serum pasien dengan multiple myeloma, Ig normal ditentukan dalam konsentrasi yang berkurang. Kandungan protein total meningkat tajam - hingga 100 g / l. Aktivitas proses pada G-myeloma dinilai dari jumlah sel plasma dalam tusukan sternum, konsentrasi kreatinin dan kalsium dalam serum darah (peningkatan kalsium menunjukkan perkembangan penyakit). Konsentrasi protein-M (dalam urin disebut protein Bence-Jones) berfungsi sebagai kriteria untuk menilai perkembangan penyakit pada A-myeloma. Konsentrasi paraprotein dalam serum dan urin bervariasi selama perjalanan penyakit di bawah pengaruh terapi.

Untuk menegakkan diagnosis mieloma multipel, kriteria berikut harus dipenuhi.

Yang besarkriteria

1. Plasmacytoma berdasarkan hasil biopsi.
2. Plasmasitosis dalam sumsum tulang merah (lebih dari 30% sel).
3. Puncak Ig monoklonal (patologis) pada elektroforesis protein serum: lebih dari 35 g/L untuk puncak IgG atau lebih dari 20 g/L untuk puncak IgA. Ekskresi rantai κ dan λ dalam jumlah 1 g/hari atau lebih, terdeteksi oleh elektroforesis urin pada pasien tanpa amiloidosis.

Kecilkriteria

1. Plasmasitosis dalam sumsum tulang merah 10-30% sel.
2. Puncak PIg dalam serum kurang dari jumlah yang ditunjukkan di atas.
3. Lesi tulang litik.
4. Konsentrasi IgM normal di bawah 0,5 g/L, IgA di bawah 1 g/L, atau IgG di bawah 0,6 g/L.

Untuk mendiagnosis mieloma multipel, diperlukan setidaknya 1 kriteria mayor dan 1 kriteria minor atau 3 kriteria minor dengan wajib memenuhi kriteria yang tercantum pada poin 1 dan 2.

Untuk menentukan stadium mieloma, sistem standardisasi Durie-Salmon digunakan, yang mencerminkan volume kerusakan tumor.

Semua kelompok mieloma dibagi menjadi beberapa subkelas tergantung pada kondisi fungsi ginjal: A - konsentrasi kreatinin serum di bawah 2 mg% (176,8 μmol/l), B - lebih dari 2 mg%. Pada penyakit mieloma, konsentrasi tinggi β ₂ -mikroglobulin dalam serum darah (lebih dari 6000 ng/ml) menunjukkan prognosis yang tidak baik, begitu pula aktivitas LDH yang tinggi (di atas 300 IU/l, reaksi ditetapkan pada suhu 30 °C), anemia, gagal ginjal, hiperkalsemia, hipoalbuminemia, dan volume tumor yang besar.

Penyakit rantai ringan (mieloma Bence Jones) mencakup sekitar 20% kasus mieloma. Pada mieloma Bence Jones, hanya rantai ringan bebas yang terbentuk, yang terdeteksi dalam urin (protein Bence Jones), tanpa adanya Ig patologis serum (gradien M).

Tahapan Mieloma Multipel

Panggung	Kriteria	Massa tumor (jumlah sel), x10 12 /m 2
SAYA	Mieloma kecil jika kriteria berikut terpenuhi: Konsentrasi hemoglobin dalam darah lebih tinggi dari 100 g/l; Konsentrasi kalsium total dalam serum darah normal (<3 mmol/l); Tidak ada perubahan tulang pada radiografi atau plasmasitoma soliter tulang; Konsentrasi paraprotein rendah dalam serum darah (IgG di bawah 50 g/l, IgA di bawah 30 g/l); Rantai L (protein Bence Jones) dalam urin kurang dari 4 g/24 jam	<0.6
II	Mieloma intermediet (kriteria antara stadium I dan III)	0,6-1,2
AKU AKU AKU	Mieloma mayor dengan satu atau lebih kriteria berikut: Konsentrasi hemoglobin dalam darah di bawah 85 g/l; Konsentrasi kalsium serum total di atas 12 mg% (3 mmol/L); Kerusakan rangka yang luas atau patah tulang yang parah; Konsentrasi paraprotein tinggi dalam serum darah (IgG lebih dari 70 g/l, IgA lebih dari 50 g/l); Rantai L (protein Bence Jones) dalam urin lebih dari 12 g/24 jam.	>1,2

Varian imunokimia langka dari penyakit mieloma meliputi mieloma non-sekresi, di mana paraprotein hanya dapat dideteksi dalam sitoplasma sel mieloma, serta mieloma diklonal dan mieloma M.

Makroglobulinemia Waldenström adalah leukemia subleukemik kronis yang berasal dari sel B, secara morfologis diwakili oleh limfosit, sel plasma, dan semua bentuk sel transisi yang mensintesis PIgM (makroglobulin). Tumor memiliki tingkat keganasan yang rendah. Di sumsum tulang merah, proliferasi limfosit basofilik kecil (limfosit plasmasitoid) terdeteksi, jumlah sel mast meningkat. Elektroforegram protein serum darah menunjukkan gradien-M di zona β- atau γ-globulin, lebih jarang paraprotein tidak bermigrasi dalam medan listrik, tetap di tempatnya. Secara imunokimia, itu adalah PIgM dengan satu jenis rantai ringan. Konsentrasi PIgM dalam serum darah pada makroglobulinemia Waldenström berkisar antara 30 hingga 79 g / l. Protein Bence Jones ditemukan dalam urin pada 55-80% pasien. Konsentrasi Ig normal dalam darah menurun. Gagal ginjal jarang terjadi.

Limfoma. Limfoma yang mensekresi IgM adalah yang paling sering tercatat, tempat kedua ditempati oleh limfoma paraproteinemik yang mensekresi IgG, limfoma dengan paraproteinemia IgA sangat jarang terdeteksi. Penurunan konsentrasi Ig normal (biasanya dalam jumlah kecil) pada limfoma tercatat pada sebagian besar pasien.

Penyakit rantai berat adalah limfoma sel B yang menghasilkan fragmen monoklonal rantai berat Ig. Penyakit rantai berat sangat jarang terjadi. Ada 4 jenis penyakit rantai berat: α, γ, μ, δ. Penyakit rantai berat γ biasanya terjadi pada pria di bawah usia 40 tahun dan ditandai dengan pembesaran hati, limpa, kelenjar getah bening, pembengkakan langit-langit lunak dan lidah, eritema, dan demam. Kerusakan tulang biasanya tidak terjadi. Konsentrasi globulin patologis dalam serum darah rendah, dan LED normal. Sel limfoid dan sel plasma dengan berbagai tingkat kematangan ditemukan di sumsum tulang. Penyakit ini berkembang dengan cepat dan berakhir dengan kematian dalam beberapa bulan. Penyakit rantai berat terdeteksi terutama pada orang tua dan paling sering dimanifestasikan oleh hepatosplenomegali. Substrat tumor adalah elemen limfoid dengan berbagai kematangan. Kasus terisolasi penyakit rantai berat δ telah dijelaskan, itu terjadi sebagai mieloma. Penyakit rantai berat α merupakan bentuk yang paling umum, terutama berkembang pada anak-anak dan orang di bawah usia 30 tahun, 85% kasus tercatat di Mediterania. Imunoelektroforesis serum darah dan urin merupakan satu-satunya metode untuk mendiagnosis penyakit ini, karena gradien M klasik pada elektroforogram protein serum sering kali tidak ada.

Paraproteinemia reaktif terjadi jika terdapat predisposisi genetik sebagai respons terhadap infeksi bakteri dan virus (hepatitis, infeksi CMV) atau invasi parasit (leishmaniasis, toksoplasmosis, schistosomiasis). Bentuk imunoglobulinopati monoklonal ini telah tercatat dalam transplantasi organ, pengobatan dengan sitostatika, defisiensi imun herediter atau didapat. Paraproteinemia sementara ditandai dengan konsentrasi PIg serum yang rendah, tidak adanya atau sedikit protein Bence Jones dalam urin.

Paraproteinemia terkait menyertai sejumlah penyakit yang patogenesisnya melibatkan mekanisme imun: penyakit autoimun, tumor, infeksi kronis. Penyakit tersebut meliputi amiloidosis AL dan krioglobulinemia.

Paraproteinemia idiopatik terjadi pada orang lanjut usia dan dapat merupakan gejala premieloma. Dalam kasus seperti itu, pemeriksaan menyeluruh diperlukan untuk mengidentifikasi stadium awal penyakit dan pengamatan dinamis jangka panjang.

Tanda-tanda paraproteinemia jinak meliputi: tidak adanya protein Bence Jones, perubahan konsentrasi Ig normal, jumlah sel plasma dalam aspirasi sumsum tulang kurang dari 15%, limfosit kurang dari 20%, konsentrasi paraprotein serum di bawah 30 g/L.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]