Mononukleosis menular: antibodi terhadap virus Epstein-Barr dalam darah

Mononukleosis infeksiosa merupakan kelainan limfoproliferatif sistemik umum yang paling sering disebabkan oleh virus Epstein-Barr. Toxoplasma gondii dan virus lainnya (CMV, human immunodeficiency virus, dan human herpes virus tipe 6, yang dikenal sebagai penyebab eksantema mendadak) dapat menyebabkan penyakit yang secara klinis serupa. Agen etiologi yang sama ini diduga dapat menyebabkan perkembangan sindrom kelelahan kronis.

Virus Epstein-Barr adalah virus herpes yang memiliki tropisme terhadap limfosit B dan bertahan dalam sel inang untuk waktu yang lama sebagai infeksi laten. Virus ini tersebar luas di seluruh dunia. Dalam hal struktur dan ukuran, virus Epstein-Barr tidak dapat dibedakan dari virus herpes lainnya, tetapi berbeda secara signifikan dari virus tersebut dalam hal sifat antigenik. Virus ini memiliki antigen membran (MA - antigen membran), antigen nuklir (EBNA - antigen nukleat Epstein-Barris) dan antigen kapsid virus (VCA - antigen kapsid virus).

Infeksi terjadi ketika virus ditularkan melalui air liur. Ketika virus Epstein-Barr memasuki tubuh, virus tersebut menginfeksi epitel faring, menyebabkan peradangan dan demam - tanda klinis khas timbulnya mononukleosis infeksius. Virus ini bersifat limfotropik, menempel pada reseptor C3α dari membran sel limfosit B, menyebabkan proliferasi limfosit B poliklonal dengan peningkatan yang sesuai pada amandel, limfadenopati sistemik, dan splenomegali. Limfosit B ditransformasikan (memperoleh kemampuan untuk membelah tanpa henti), dan dengan tidak adanya respons imun seluler yang memadai, proses ini dapat berkembang menjadi ganas (misalnya, pada sindrom limfoproliferatif terkait-X). Jika faktor imunitas seluler mengendalikan replikasi virus Epstein-Barr dalam tubuh, gejala klinis mononukleosis infeksius secara bertahap menghilang.

Seperti virus herpes lainnya, EBV dapat bertahan sebagai infeksi laten (DNA-nya terdapat dalam nukleus sejumlah kecil limfosit B). Reaktivasi infeksi asimtomatik sesekali umum terjadi, dengan sekitar 20% orang dewasa muda yang sehat mengeluarkan EBV dalam air liur mereka. Individu dengan gangguan imunitas seluler (misalnya, AIDS, ataksia-telangiektasia, penerima transplantasi) dapat mengembangkan infeksi reaktif terbuka dengan leukoplakia berbulu, pneumonitis interstisial, atau limfoma sel B monoklonal. EBV telah terlibat dalam etiologi karsinoma nasofaring dan limfoma Burkitt.

Salah satu manifestasi mononukleosis infeksiosa adalah munculnya limfosit atipikal dalam darah tepi (hingga 10% dari jumlah total limfosit). Limfosit atipikal terdeteksi dalam darah sejak awal periode manifestasi klinis infeksi. Kandungannya dalam darah mencapai puncaknya pada akhir minggu ke-2 atau awal minggu ke-3 dan dapat bertahan pada level ini hingga 1,5-2 bulan, hilangnya limfosit secara total biasanya terjadi pada awal bulan ke-4 sejak timbulnya penyakit. Kehadiran limfosit atipikal merupakan tanda infeksi yang relatif tidak sensitif yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr, tetapi memiliki spesifisitas umum sekitar 95%.

Proliferasi limfosit B poliklonal pada infeksi yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr menghasilkan sejumlah besar berbagai autoantibodi dalam tubuh pasien, seperti IgM anti-i (aglutinin dingin), faktor reumatoid, antibodi antinuklear. Sebagian besar Ig yang tidak biasa yang muncul pada mononukleosis infeksiosa disebut antibodi heterofil Paul-Bunnell. Antibodi ini termasuk dalam kelas IgM, mereka memiliki afinitas terhadap eritrosit domba dan kuda, dan tidak diarahkan ke antigen virus Epstein-Barr apa pun. Antibodi heterofil adalah produk acak dari proliferasi limfoid B (disebabkan oleh virus Epstein-Barr), mereka muncul pada minggu pertama mononukleosis infeksiosa dan secara bertahap menghilang selama pemulihan, mereka biasanya tidak terdeteksi setelah 3-6 bulan.

Ketika tahap akut awal infeksi menjadi laten, genom virus Epstein-Barr (antigen unik) muncul dalam jumlah besar di semua sel, dan antigen nuklir dilepaskan ke lingkungan. Sebagai respons terhadap antigen, antibodi spesifik disintesis - penanda penting dari stadium penyakit. Segera setelah infeksi, limfosit B mendeteksi antigen awal (EA), protein yang diperlukan untuk replikasi virus Epstein-Barr (dan bukan komponen virus struktural). Antibodi kelas IgM dan IgG disintesis dalam tubuh pasien terhadap antigen awal. Bersama dengan virion virus Epstein-Barr yang lengkap, antigen kapsid virus (VCA) dan antigen membran (MA) muncul. Ketika proses infeksi mereda, sebagian kecil limfosit B yang terinfeksi virus Epstein-Barr menghindari kerusakan imun dan mempertahankan genom virus dalam bentuk laten. Antigen nuklir virus Epstein-Barr (EBNA) bertanggung jawab atas duplikasi dan kelangsungan hidupnya.

Tes laboratorium dapat mendeteksi antibodi terhadap berbagai antigen.

Dari metode serologis untuk mendiagnosis mononukleosis infeksius, yang paling umum adalah reaksi Paul-Bunnell (aglutinasi), yang bertujuan untuk mengidentifikasi antibodi heterofilik dalam serum. Titer antibodi heterofilik sebesar 1:224 atau lebih tinggi dalam serum darah pasien diakui sebagai signifikan secara diagnostik, yang mengonfirmasi diagnosis mononukleosis infeksius. Aglutinasi heterofilik positif pada 60% orang muda setelah 2 minggu dan pada 90% setelah 4 minggu sejak timbulnya manifestasi klinis penyakit. Oleh karena itu, untuk mendiagnosis mononukleosis infeksius, perlu dilakukan beberapa penelitian: pada minggu pertama penyakit (reaksinya mungkin negatif) dan setelah 1-2 minggu (reaksinya mungkin menjadi positif). Kandungan antibodi heterofilik menurun pada akhir periode akut proses infeksi, tetapi titernya dapat ditentukan dalam waktu 9 bulan setelah timbulnya gejala klinis. Reaksi Paul-Bunnell dapat berubah dari positif menjadi negatif, bahkan dengan latar belakang gejala hematologi dan klinis yang tersisa pada pasien. Sensitivitas metode pada orang dewasa adalah 98%, spesifisitas - 99%. Pada anak-anak dengan mononukleosis menular di bawah usia 2 tahun, antibodi heterofil terdeteksi hanya pada 30% pasien, pada usia 2-4 tahun - pada 75%, di atas 4 tahun - lebih dari 90%. Sensitivitas metode pada anak-anak kurang dari 70%, spesifisitas - 20%. Penurunan dan kemudian peningkatan berulang dalam titer antibodi heterofil dapat terjadi sebagai respons terhadap infeksi lain (paling sering dengan infeksi virus pada saluran pernapasan atas). Reaksi Paul-Bunnell tidak spesifik untuk virus Epstein-Barr. Titer antibodi heterofil tidak bereaksi silang dan tidak berkorelasi dengan antibodi spesifik terhadap virus Epstein-Barr, juga tidak ada korelasi dengan tingkat keparahan penyakit. Tes ini tidak berguna untuk mendiagnosis mononukleosis menular kronis (rata-rata positif hanya pada 10% pasien).

Titer 1:56 dan kurang dapat ditemukan pada orang sehat dan pada pasien dengan penyakit lain (rheumatoid arthritis, rubella). Hasil tes positif palsu sangat jarang terjadi.

Saat ini, metode "titik tunggal" (aglutinasi slide) digunakan untuk menentukan antibodi terhadap sel darah merah domba; awalnya digunakan sebagai uji skrining. Dalam hal sensitivitas, metode ini sebanding dengan reaksi Paul-Bunnell. Uji slide dapat memberikan hasil positif palsu pada sekitar 2% penelitian (pada leukemia, limfoma ganas, malaria, rubella, hepatitis virus, karsinoma pankreas), dan hasil negatif palsu pada orang dewasa - pada 5-7% kasus.

Perlu dicatat bahwa jangkauan sistem uji diagnostik yang diproduksi oleh perusahaan berdasarkan penentuan titer antibodi sangat luas, oleh karena itu perlu untuk fokus pada titer antibodi diagnostik yang ditunjukkan dalam petunjuk untuk sistem pengujian.

Jika antibodi heterofilik tidak terdeteksi dan gambaran klinis penyakit tersebut sesuai dengan mononukleosis infeksiosa, perlu dilakukan pemeriksaan serum darah untuk antibodi spesifik golongan IgM dan IgG. Untuk mendeteksi antibodi spesifik terhadap virus Epstein-Barr, digunakan metode imunofluoresensi tidak langsung (memungkinkan deteksi antibodi terhadap antigen EA dan VCA), imunofluoresensi antikomplemen (mendeteksi antibodi terhadap antigen EA, VCA, dan EBNA), dan ELISA.

Antibodi terhadap komponen antigen EA D (anti-EA-D) muncul bahkan selama periode laten infeksi primer dan cepat menghilang seiring pemulihan.

Antibodi terhadap komponen antigen EA R (anti-EA-R) dapat dideteksi 3-4 minggu setelah manifestasi klinis penyakit. Antibodi ini bertahan dalam serum darah selama sekitar satu tahun, dan sering terdeteksi pada mononukleosis infeksiosa atipikal atau yang berlarut-larut. Antibodi ini biasanya ditemukan pada limfoma Burkitt.

Antibodi terhadap VCA kelas IgM (anti-VCA IgM) muncul sangat dini, biasanya sebelum gejala klinis, terdeteksi pada awal penyakit pada 100% kasus. Titer tinggi terjadi pada 1-6 minggu sejak timbulnya infeksi, mulai menurun sejak minggu ke-3 dan biasanya menghilang setelah 1-6 bulan. Anti-VCA IgM hampir selalu ada dalam serum selama infeksi aktif, sehingga metode deteksinya sangat sensitif dan spesifik untuk episode akut mononukleosis infeksiosa.

Antibodi terhadap IgG kelas VCA (anti-VCA IgG) dapat muncul lebih awal (pada minggu ke-1-4), jumlahnya mencapai puncaknya pada bulan ke-2 penyakit. Pada awal penyakit, antibodi ini terdeteksi pada 100% kasus. Hanya 20% pasien yang menunjukkan peningkatan titer sebanyak 4 kali lipat saat pemeriksaan serum berpasangan. Titer menurun selama pemulihan, tetapi dapat dideteksi selama beberapa tahun setelah infeksi, sehingga tidak berguna untuk mendiagnosis mononukleosis infeksiosa. Kehadiran anti-VCA IgG menunjukkan keadaan setelah infeksi dan kekebalan.

Antibodi terhadap EBNA (anti-EBNA) muncul terakhir, jarang ada pada fase akut penyakit. Kandungannya meningkat selama masa pemulihan (dalam 3-12 bulan), mereka dapat tetap berada dalam darah selama bertahun-tahun setelah penyakit. Tidak adanya anti-EBNA dengan adanya anti-VCA IgM dan anti-EA IgM menunjukkan adanya infeksi saat ini. Deteksi anti-EBNA setelah reaksi negatif sebelumnya menunjukkan adanya infeksi. Dengan menggunakan metode ELISA, dimungkinkan untuk secara bersamaan menentukan keberadaan kelas anti-EBNA IgM dan IgG. Jika jumlah anti-EBNA IgM lebih besar daripada anti-EBNA IgG, infeksi akut harus didiskusikan, dengan rasio yang berlawanan - yang sebelumnya diderita.

Adanya satu atau lebih tanda-tanda berikut menunjukkan infeksi primer akut:

• anti-VCA IgG (terdeteksi dini, dan kemudian kandungannya menurun);
• titer tinggi (lebih dari 1:320) atau peningkatan 4 kali lipat titer anti-VCA IgG selama perjalanan penyakit;
• peningkatan sementara titer anti-EA-D (1:10 atau lebih);
• anti-VCA IgG awal tanpa anti-EBNA, dan kemudian munculnya anti-EBNA.

Infeksi akut atau primer yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr dikecualikan jika titer anti-VCA IgG dan anti-EBNA dalam serum darah tidak berubah saat dipelajari secara dinamis (selama periode akut dan selama pemulihan).

Kehadiran antigen awal dan anti-VCA IgG yang terus-menerus dalam titer tinggi menunjukkan fase infeksi kronis.

Deteksi antibodi terhadap virus Epstein-Barr digunakan untuk mendiagnosis mononukleosis infeksius dan infeksi kronis yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr.

Antibodi terhadap virus Epstein-Barr dapat dideteksi pada penyakit berikut: keadaan imunodefisiensi sekunder, termasuk infeksi HIV, karsinoma nasofaring, limfoma Burkitt, infeksi CMV, sifilis, penyakit Lyme, brucellosis, dll.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]