PCR Hepatitis C

HCV biasanya tidak ada dalam materi tersebut.

Berbeda dengan metode serologis untuk mendiagnosis hepatitis C virus, yang mendeteksi antibodi terhadap HCV, PCR memungkinkan untuk mendeteksi keberadaan RNA HCV secara langsung dan mengukur konsentrasinya dalam bahan uji. Uji ini memiliki spesifisitas spesies dan sensitivitas tinggi: sepuluh molekul RNA HCV dalam bahan uji sudah cukup untuk mendeteksinya. Deteksi antibodi terhadap HCV hanya mengonfirmasi fakta infeksi pasien, tetapi tidak memungkinkan untuk menilai aktivitas proses infeksi (replikasi virus) dan prognosis penyakit. Selain itu, antibodi terhadap HCV terdeteksi baik dalam darah pasien dengan hepatitis akut maupun kronis, dan pada pasien yang sakit dan pulih, dan seringkali antibodi dalam darah muncul hanya beberapa bulan setelah timbulnya gambaran klinis penyakit, yang mempersulit diagnosis. Deteksi HCV dalam darah menggunakan PCR merupakan metode diagnostik yang lebih informatif. Deteksi RNA HCV dalam PCR menunjukkan viremia, memungkinkan untuk menilai replikasi virus dalam tubuh dan berfungsi sebagai salah satu kriteria untuk efektivitas terapi antivirus. Deteksi RNA HCV melalui PCR pada tahap awal infeksi virus tanpa adanya penanda serologis apa pun dapat menjadi bukti awal infeksi. Namun, deteksi RNA HCV secara terpisah tanpa adanya penanda serologis lain tidak dapat sepenuhnya menyingkirkan hasil PCR positif palsu. Dalam kasus seperti itu, penilaian komprehensif terhadap studi klinis, biokimia, dan morfologi dengan konfirmasi berulang kali adanya infeksi melalui PCR diperlukan.

Penggunaan metode PCR pada pasien dengan hepatitis C virus kronis sangat penting, karena sebagian besar dari mereka tidak memiliki korelasi antara keberadaan replikasi virus dan aktivitas enzim hati. Dalam kasus seperti itu, hanya PCR yang memungkinkan kita untuk menilai keberadaan replikasi virus, terutama jika hasil akhir dinyatakan secara kuantitatif. Dalam sebagian besar kasus penyakit, hilangnya RNA HCV dari serum darah terjadi lebih lambat daripada normalisasi enzim hati, sehingga normalisasinya tidak dapat dijadikan dasar untuk menghentikan pengobatan antivirus.

Secara praktis penting untuk memeriksa tidak hanya serum darah, tetapi juga limfosit dan spesimen hepatobiopsi menggunakan metode PCR untuk mendeteksi RNA HCV. Virus dapat dideteksi 2-3 kali lebih sering di jaringan hati daripada di serum darah. Ketika mengevaluasi hasil tes serum darah untuk RNA HCV, harus diingat bahwa viremia dapat berfluktuasi di alam (serta perubahan aktivitas enzim). Oleh karena itu, setelah hasil tes PCR positif, hasil negatif dapat diperoleh dan sebaliknya. Dalam kasus seperti itu, lebih baik untuk memeriksa spesimen hepatobiopsi untuk mengatasi keraguan yang timbul.

Deteksi RNA HCV dalam material menggunakan PCR digunakan untuk tujuan berikut:

• penyelesaian hasil uji serologi yang meragukan;
• diferensiasi hepatitis C virus dari bentuk hepatitis lainnya;
• identifikasi tahap akut penyakit dibandingkan dengan infeksi atau kontak sebelumnya; penentuan tahap infeksi bayi baru lahir dari ibu seropositif HCV;
• memantau efektivitas pengobatan antivirus.

Pasien yang diduga terkena hepatitis C virus:

• donor;
• orang-orang dengan faktor risiko;
• individu dengan aktivitas ALT tinggi;
• pasien dengan hepatitis akut

Semua fitur evaluasi hasil dan pendekatan diagnosis HCV menggunakan PCR yang disebutkan di atas juga berlaku untuk infeksi lainnya.

Metode PCR tidak hanya memungkinkan untuk mendeteksi RNA HCV dalam bahan yang diteliti, tetapi juga untuk menetapkan genotipenya. Penentuan genotipe virus sangat penting untuk pemilihan pasien dengan hepatitis C virus kronis untuk pengobatan dengan interferon alfa dan ribavirin. Indikasi laboratorium untuk pengobatan hepatitis C virus kronis dengan interferon alfa adalah sebagai berikut:

• peningkatan aktivitas transaminase;
• adanya RNA HCV dalam darah;
• HCV genotipe 1;
• viremia tinggi dalam darah (lebih dari 8×105 ^salinan /ml).

Saat ini, kandungan RNA HCV dalam serum darah dapat ditentukan secara kuantitatif menggunakan metode PCR, yang sangat penting untuk memantau pengobatan interferon alfa. Tingkat viremia dinilai sebagai berikut: dengan kandungan RNA HCV dari 10 ² hingga 10 ⁴ kopi/ml - lemah; dari 10 ⁵ hingga 10 ⁷ kopi/ml - rata-rata, di atas 10 ⁸ kopi/ml - tinggi. Dengan pengobatan yang efektif, tingkat viremia menurun.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]