Semua konten iLive ditinjau secara medis atau diperiksa fakta untuk memastikan akurasi faktual sebanyak mungkin.
Kami memiliki panduan sumber yang ketat dan hanya menautkan ke situs media terkemuka, lembaga penelitian akademik, dan, jika mungkin, studi yang ditinjau secara medis oleh rekan sejawat. Perhatikan bahwa angka dalam tanda kurung ([1], [2], dll.) Adalah tautan yang dapat diklik untuk studi ini.
Jika Anda merasa salah satu konten kami tidak akurat, ketinggalan zaman, atau dipertanyakan, pilih dan tekan Ctrl + Enter.
Reaksi Rantai Polimerase (PCR) dalam diagnosis penyakit menular
Ahli medis artikel
Terakhir ditinjau: 05.07.2025
PCR merupakan salah satu metode diagnostik DNA yang memungkinkan peningkatan jumlah salinan bagian genom (DNA) bakteri atau virus yang terdeteksi hingga jutaan kali lipat dengan menggunakan enzim DNA polimerase. Bagian asam nukleat yang diuji yang spesifik terhadap genom tertentu digandakan (diperbanyak) berkali-kali lipat, sehingga dapat diidentifikasi. Pertama, molekul DNA bakteri atau virus dibagi menjadi dua rantai dengan pemanasan, kemudian dengan adanya primer DNA yang disintesis (urutan nukleotida spesifik terhadap genom yang ditentukan), keduanya berikatan dengan bagian DNA yang saling melengkapi, dan rantai asam nukleat kedua disintesis setelah setiap primer dengan adanya DNA polimerase termostabil. Dua molekul DNA diperoleh. Proses ini diulang berkali-kali. Satu molekul DNA, yaitu satu partikel bakteri atau virus, sudah cukup untuk diagnostik. Pengenalan tahap tambahan ke dalam reaksi - sintesis DNA pada molekul RNA menggunakan enzim reverse transcriptase - memungkinkan untuk menguji virus RNA, seperti virus HCV. PCR merupakan proses tiga tahap yang berulang secara siklis: denaturasi, penempelan primer, sintesis DNA (polimerisasi). Jumlah DNA yang disintesis diidentifikasi melalui ELISA atau elektroforesis.
PCR dapat menggunakan berbagai bahan biologis - serum atau plasma darah, kerokan uretra, biopsi, cairan pleura, cairan serebrospinal, dll. PCR terutama digunakan untuk mendiagnosis penyakit menular seperti hepatitis B virus, hepatitis C virus, hepatitis D virus, infeksi CMV, infeksi menular seksual (gonore, klamidia, mikoplasma, infeksi ureaplasma), tuberkulosis, infeksi HIV, dll.
Keunggulan PCR dalam mendiagnosis penyakit menular dibandingkan metode penelitian lain adalah sebagai berikut:
- Agen infeksius dapat dideteksi di lingkungan biologis apa pun di dalam tubuh, termasuk bahan yang diperoleh selama biopsi;
- adalah mungkin untuk mendiagnosis penyakit menular pada tahap paling awal dari penyakit tersebut;
- dapat dilakukan penilaian kuantitatif terhadap hasil penelitian (berapa banyak virus atau bakteri yang terkandung dalam material yang diteliti);
- Sensitivitas metode yang tinggi; misalnya, sensitivitas PCR untuk mendeteksi DNA virus hepatitis B dalam darah adalah 0,001 pg/ml (sekitar 4×102 kopi /ml), sedangkan sensitivitas metode hibridisasi DNA menggunakan probe bercabang adalah 2,1 pg/ml (sekitar 7×105 kopi /ml).
[