Pengujian kerentanan antibiotik: persiapan, penguraian, berapa banyak yang dilakukan

Saat ini, pengujian kepekaan antibiotik menjadi semakin populer. Mikroflora manusia cukup beragam, diwakili oleh sejumlah besar mikroorganisme dalam berbagai biotop.

Perusahaan farmasi telah mengembangkan sejumlah besar agen antibakteri, antibiotik, yang membantu mempertahankan rasio dan jumlah populasi mikroba yang normal. Dengan dimulainya era antibiotik, banyak penyakit yang sebelumnya dianggap fatal telah disembuhkan. Tetapi mikroorganisme juga berusaha untuk bertahan hidup, secara bertahap beradaptasi dengan aksi obat antibakteri. Seiring berjalannya waktu, banyak dari mereka telah memperoleh resistensi terhadap banyak obat, memperbaikinya dalam genotipe dan mulai mewariskannya dari generasi ke generasi. Dengan demikian, mikroorganisme baru pada awalnya tidak sensitif terhadap obat-obatan tertentu, dan penggunaannya mungkin tidak efektif. Apoteker mengembangkan semakin banyak produk baru, menambahkan komponen aktif baru ke dalamnya, mengubah formula dasar. Namun secara bertahap, resistensi terhadapnya juga berkembang.

Alasan meningkatnya resistensi mikroflora terhadap banyak obat, dan bahkan analognya, sering kali tersembunyi dalam penggunaan antibiotik yang tidak tepat dan tidak terkontrol. Dokter meresepkan antibiotik dan kombinasinya untuk berbagai penyakit bakteri. Pada saat yang sama, tidak ada penilaian awal tentang seberapa efektifnya, dosis optimal tidak dipilih, yang sangat penting baik untuk pengobatan maupun untuk mencegah mekanisme pengembangan resistensi lebih lanjut. Banyak orang secara keliru meresepkan terapi antibakteri bahkan untuk penyakit virus, yang tidak efektif, karena antibiotik tidak bekerja melawan virus.

Terapi sering diresepkan tanpa pengujian sensitivitas awal, pemilihan agen aktif dan dosis yang diperlukan untuk setiap penyakit dan biotop tertentu tidak dilakukan. Karena antibiotik diresepkan "secara membabi buta", sering kali ada kasus ketika antibiotik tidak menunjukkan aktivitas apa pun terhadap mikroorganisme yang menyebabkan penyakit dan yang jumlahnya perlu dikurangi. Sebaliknya, antibiotik memengaruhi perwakilan mikroflora lainnya, yang mengakibatkan disbakteriosis, yang juga merupakan patologi yang agak berbahaya dan dapat menyebabkan konsekuensi serius. Yang paling berbahaya adalah kasus ketika antibiotik menghancurkan mikroflora normal, yang dirancang untuk melindungi tubuh dan mempertahankan fungsi normalnya. Ada juga kasus ketika terlalu banyak atau terlalu sedikit obat yang diresepkan.

Pasien juga tidak bertanggung jawab dalam pengobatan. Sering kali, pengobatan dihentikan setelah gejala penyakit tidak lagi mengganggu. Pada saat yang sama, banyak yang memilih untuk tidak menyelesaikan pengobatan secara tuntas. Ini adalah salah satu faktor yang berkontribusi terhadap perkembangan resistensi pada bakteri. Pengobatan secara tuntas dirancang untuk membunuh mikroflora patogen secara tuntas. Jika pengobatan tidak tuntas, mikroflora tersebut tidak sepenuhnya terbunuh. Mikroorganisme yang bertahan hidup mengalami mutasi, mengembangkan mekanisme yang memberi mereka perlindungan dari obat ini, dan meneruskannya ke generasi berikutnya. Bahayanya adalah resistensi tidak hanya berkembang dalam kaitannya dengan obat khusus ini, tetapi juga terhadap seluruh kelompok obat.

Oleh karena itu, saat ini salah satu cara terapi rasional dan pencegahan resistensi yang paling efektif adalah penentuan awal sensitivitas terhadap obat yang diresepkan dan pemilihan dosis optimalnya.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Indikasi untuk prosedur ini tes sensitivitas antibiotik

Biasanya, analisis semacam itu harus dilakukan dalam semua kasus yang memerlukan terapi antibakteri. Berdasarkan hukum dasar terapi antibiotik, antibiotik apa pun dapat diresepkan hanya setelah penilaian awal sensitivitas mikroflora terhadap agen ini telah dilakukan, dan konsentrasi optimal zat aktif telah ditentukan dalam kondisi laboratorium. Dalam praktiknya, karena berbagai alasan dan keadaan, penelitian semacam itu tidak dilakukan sebelum dimulainya pengobatan, dan dokter terpaksa memilih obat "secara acak".

Saat ini, pengujian sensitivitas hanya dilakukan dalam kasus-kasus ketika dokter memiliki keraguan serius tentang efektivitas obat yang diresepkan, dalam kasus tidak adanya efek obat dalam jangka waktu yang lama, dan juga ketika menggunakan obat yang sama berulang kali dalam jangka waktu yang terbatas. Sensitivitas sering ditentukan dalam pengobatan penyakit menular seksual. Banyak spesialis beralih ke analisis jika terjadi efek samping, reaksi alergi, dan ketika perlu mengganti satu obat dengan obat lain.

Analisis ini juga sering digunakan untuk memilih obat untuk terapi antibakteri dalam masa pemulihan setelah operasi, intervensi laparoskopi, dan pengangkatan organ. Di departemen bedah dan bedah purulen, studi semacam itu sangat diperlukan, karena resistensi berkembang cukup cepat di sini. Selain itu, obat yang "diperoleh di rumah sakit" yang sangat resistan pun berkembang. Banyak klinik swasta yang mendekati resep obat dengan tanggung jawab penuh - hanya setelah memeriksa sensitivitasnya. Dalam banyak kasus, anggaran lembaga negara tidak memungkinkan untuk melakukan studi semacam itu untuk setiap pasien yang memerlukan terapi antibakteri.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Persiapan

Persiapan untuk penelitian ini tidak memerlukan tindakan khusus. Sama halnya dengan tes lainnya. Beberapa hari sebelum penelitian, Anda harus menghindari minum alkohol. Pada pagi hari, pada hari pengambilan bahan, dalam kebanyakan kasus, Anda tidak boleh makan atau minum. Namun semuanya tergantung pada jenis analisis. Bahan untuk penelitian mungkin berbeda, tergantung pada penyakitnya.

Jika terjadi penyakit tenggorokan dan saluran pernapasan, usap tenggorokan dan hidung diambil. Dalam penyakit kelamin, ginekologi, urologi, usap genital dan darah diambil untuk analisis. Dalam penyakit ginjal, urin sering diperlukan. Dalam kasus penyakit gastrointestinal dan beberapa penyakit menular, tinja dan muntah diperiksa. Kadang-kadang ASI, sekret hidung, sekresi mata, air liur, dan dahak dapat diperiksa. Dalam kasus patologi parah dan dugaan proses infeksi, bahkan cairan serebrospinal diperiksa. Spektrumnya cukup luas.

Ciri-ciri pengumpulan bahan ditentukan oleh afiliasi biologisnya. Jadi, urin dan feses dikumpulkan pada pagi hari dalam wadah bersih atau dalam wadah khusus untuk bahan biologis. ASI dikumpulkan sebelum menyusui. Bagian tengah diambil untuk pemeriksaan. Apusan dikumpulkan menggunakan kapas khusus, yang dilewatkan di sepanjang selaput lendir, kemudian diturunkan ke dalam tabung reaksi dengan media yang telah disiapkan. Darah dikumpulkan dalam tabung reaksi, dari jari atau vena. Saat mengumpulkan apusan dari uretra atau vagina, dianjurkan untuk tidak melakukan hubungan seksual selama beberapa hari.

Saat mengumpulkan bahan biologis untuk penelitian, pertama-tama perlu dipastikan bahwa pengumpulan dan sterilitasnya benar. Namun, dalam kebanyakan kasus, hal ini menjadi perhatian tenaga medis, pasien tidak perlu khawatir tentang hal ini. Paling sering, dokter kandungan dan ahli urologi beralih ke penelitian semacam itu, di tempat kedua - ahli otolaringologi dalam pengobatan penyakit nasofaring dan faring, saluran pernapasan bagian atas.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Teknik tes sensitivitas antibiotik

Bahan biologis yang terkumpul dikirim ke laboratorium dalam kondisi steril, tempat penelitian lebih lanjut dilakukan. Pertama-tama, penyemaian primernya dilakukan pada media nutrisi universal. Sebagian bahan juga diambil untuk pemeriksaan mikroskopis. Apusan untuk mikroskopi disiapkan, penelitian dilakukan, yang dengannya dimungkinkan untuk menentukan gambaran perkiraan, untuk mengasumsikan mikroorganisme mana yang ada dalam sampel. Hal ini memungkinkan untuk memilih lingkungan yang paling optimal untuk penelitian lebih lanjut dan identifikasi mikroorganisme. Selain itu, tanda-tanda yang menunjukkan peradangan, proses onkologis dapat dilihat pada mikroskopi.

Selama beberapa hari, koloni mikroorganisme tumbuh dalam cawan Petri. Kemudian, beberapa koloni diambil dan dipindahkan ke media nutrisi selektif, yang memungkinkan untuk menentukan kelompok mikroorganisme secara perkiraan. Mereka diinkubasi selama beberapa hari dalam termostat, dan kemudian identifikasi (penentuan jenis mikroorganisme) dimulai. Identifikasi dilakukan dengan menggunakan uji biokimia dan genetik khusus, pengenal. Selain itu, studi imunologi dapat dilakukan.

Setelah patogen utama diisolasi, sensitivitasnya terhadap antibiotik dinilai. Ada beberapa metode untuk ini. Metode yang paling umum digunakan adalah pengenceran serial, atau metode difusi cakram. Metode ini dijelaskan secara rinci dalam buku referensi mikrobiologi, pedoman, dan standar laboratorium.

Inti dari metode difusi cakram adalah mikroorganisme yang telah diidentifikasi disemai pada media nutrisi, dan cakram khusus yang direndam dalam antibiotik diletakkan di atasnya. Penyemaian diinkubasi dalam termostat selama beberapa hari, kemudian hasilnya diukur. Tingkat penghambatan pertumbuhan bakteri oleh masing-masing antibiotik dinilai. Jika bakteri sensitif terhadap antibiotik, "zona lisis" terbentuk di sekitar cakram, di mana bakteri tidak bereproduksi. Pertumbuhannya lambat atau tidak ada sama sekali. Diameter zona penghambatan pertumbuhan digunakan untuk menentukan tingkat sensitivitas mikroorganisme terhadap antibiotik dan merumuskan rekomendasi lebih lanjut.

Metode pengenceran serial adalah yang paling akurat. Untuk ini, mikroorganisme disemai pada media nutrisi cair, antibiotik yang diencerkan sesuai dengan sistem pengenceran desimal ditambahkan. Setelah ini, tabung reaksi ditempatkan dalam termostat untuk inkubasi selama beberapa hari. Kepekaan terhadap antibiotik ditentukan oleh tingkat pertumbuhan bakteri dalam kaldu nutrisi dengan penambahan antibiotik. Konsentrasi minimum di mana mikroorganisme masih tumbuh dicatat. Ini adalah dosis minimum obat (diperlukan perhitungan ulang dari unit mikrobiologis ke zat aktif).

Ini adalah metode mikrobiologi standar yang menjadi dasar penelitian apa pun. Metode ini melibatkan pelaksanaan semua manipulasi secara manual. Saat ini, banyak laboratorium dilengkapi dengan peralatan khusus yang menjalankan semua prosedur ini secara otomatis. Seorang spesialis yang bekerja dengan peralatan tersebut hanya perlu memiliki kemampuan untuk bekerja dengan peralatan tersebut, mematuhi aturan keselamatan dan sterilitas.

Perlu diperhatikan bahwa indeks sensitivitas dalam kondisi laboratorium dan pada organisme hidup berbeda tajam. Oleh karena itu, seseorang diberi resep dosis yang lebih tinggi daripada yang ditentukan selama penelitian. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa tubuh tidak memiliki kondisi optimal untuk pertumbuhan bakteri. Di laboratorium, "kondisi ideal" diciptakan. Sebagian obat dapat dinetralkan oleh aksi air liur, cairan lambung. Sebagian dinetralkan dalam darah oleh antibodi dan antitoksin yang diproduksi oleh sistem kekebalan tubuh.

Tes sensitivitas antibiotik urin

Pertama, bahan biologis dikumpulkan. Untuk melakukan ini, Anda perlu mengumpulkan bagian tengah urin pagi dan mengirimkannya ke laboratorium. Penting untuk menjaga kemandulan dan tidak mengonsumsi antibiotik selama beberapa hari sebelum analisis, jika tidak, Anda bisa mendapatkan hasil negatif palsu. Setelah ini, penaburan standar dilakukan, yang intinya adalah mengisolasi kultur patogen murni dan memilih antibiotik yang akan memiliki efek bakterisida optimal padanya. Konsentrasi antibiotik yang dibutuhkan ditentukan.

Analisis urin paling sering diresepkan ketika ada kecurigaan adanya proses infeksi dan peradangan pada sistem genitourinari, dengan defisiensi imun dan gangguan metabolisme. Biasanya, urin adalah cairan steril. Durasi penelitian semacam itu adalah 1-10 hari dan ditentukan oleh laju pertumbuhan mikroorganisme.

Kultur dan pengujian sensitivitas antibiotik

Studi ini melibatkan isolasi mikroorganisme yang merupakan patogen ke dalam kultur murni. Terkadang mungkin ada beberapa mikroorganisme seperti itu (infeksi campuran). Beberapa mikroorganisme mampu membentuk biofilm, yang merupakan semacam "komunitas mikroba". Tingkat kelangsungan hidup biofilm jauh lebih tinggi daripada mikroorganisme tunggal atau asosiasi. Selain itu, tidak semua antibiotik mampu memengaruhi biofilm dan menembusnya.

Untuk menentukan patogen, mengisolasinya ke dalam kultur murni, dilakukan penyemaian. Selama penelitian, beberapa kali penyemaian dilakukan di berbagai media nutrisi. Kemudian kultur murni diisolasi, afiliasi biologisnya ditentukan, dan sensitivitas terhadap obat antibakteri ditentukan. Konsentrasi optimal dipilih.

Bahan biologis apa pun dapat digunakan untuk penelitian, tergantung pada penyakit dan lokasi proses infeksi. Durasi ditentukan oleh laju pertumbuhan mikroorganisme.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Tes sensitivitas tinja

Tinja diperiksa pada berbagai penyakit lambung dan usus, jika ada dugaan proses infeksi, keracunan bakteri, keracunan makanan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengisolasi patogen dan memilih obat antibakteri yang optimal untuknya, yang akan memiliki aktivitas tinggi. Pentingnya jenis penelitian ini adalah memungkinkan untuk memilih obat yang hanya akan memengaruhi patogen dan tidak akan memengaruhi perwakilan mikroflora normal.

Tahap pertama dan sangat penting adalah pengumpulan feses. Feses harus dikumpulkan dalam wadah steril khusus di pagi hari. Feses harus disimpan tidak lebih dari 1-2 jam. Wanita yang sedang menstruasi harus menunda analisis hingga akhir, karena keakuratan hasilnya akan berubah. Bahan tersebut dikirim ke laboratorium untuk diuji. Analisis dilakukan dengan menggunakan teknik mikrobiologi standar untuk menabur dan mengisolasi kultur murni. Antibiogram juga dilakukan. Berdasarkan kesimpulan, rekomendasi dikembangkan, dan skema penelitian lebih lanjut ditentukan.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Analisis disbakteriosis dengan sensitivitas

Bahan untuk penelitian ini adalah feses yang diambil segera setelah buang air besar. Mikroflora normal saluran pencernaan terdiri dari perwakilan flora normal dan beberapa perwakilan flora patogen. Komposisi spesies, kuantitas, dan rasio mereka didefinisikan secara ketat dan dijaga dalam norma yang diizinkan. Jika rasio ini terganggu, disbakteriosis berkembang. Ini dapat memanifestasikan dirinya dalam berbagai cara. Penyakit menular dapat berkembang jika jumlah mikroflora patogen meningkat tajam. Jika jumlah mikroorganisme apa pun berkurang tajam, ruang kosong ditempati oleh perwakilan lain yang tidak khas saluran pencernaan, atau patogen. Seringkali ruang kosong ditempati oleh jamur, kemudian berbagai infeksi jamur dan kandidiasis berkembang.

Untuk menentukan komposisi kuantitatif dan kualitatif mikroflora usus, analisis tinja untuk disbakteriosis dilakukan. Secara konvensional, semua perwakilan yang hidup di usus dibagi menjadi tiga kelompok: patogen, oportunistik, dan non-patogen. Dengan demikian, analisis terdiri dari tiga bagian. Setiap kelompok mikroorganisme memiliki kebutuhannya sendiri akan sumber makanan, energi. Setiap kelompok membutuhkan media nutrisi dan aditif selektif yang terpisah.

Pertama, mikroskopi dan pembibitan primer dilakukan. Kemudian, setelah pembibitan, koloni terbesar dipilih, yang memiliki ciri morfologi serupa dengan perwakilan masing-masing kelompok. Mereka dipindahkan ke media selektif. Setelah mikroorganisme tumbuh, mereka diidentifikasi dan segera diuji kepekaannya terhadap antibiotik. Metode mikrobiologi standar digunakan.

Studi tentang sekelompok mikroorganisme patogen, selain studi standar, melibatkan penentuan bakteri tifoid, paratifoid, dan disentri. Juga ditentukan apakah seseorang merupakan pembawa mikroorganisme ini. Studi komprehensif untuk disbakteriosis juga mencakup studi tentang perwakilan kelompok bifidobacteria dan lactobacilli. Studi ini memakan waktu sekitar satu minggu dan tergantung pada tingkat pertumbuhan mikroorganisme.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Pengujian kerentanan bakteriofag

Dalam kasus infeksi usus, bakteriofag sering digunakan sebagai pengobatan, bukan antibiotik. Bakteriofag adalah virus bakteri yang hanya rentan terhadap bakteriofag. Bakteriofag menemukan bakteri yang cocok dengannya, menembusnya, dan secara bertahap menghancurkan sel bakteri. Akibatnya, proses infeksi berhenti. Namun, tidak semua bakteri sensitif terhadap bakteriofag. Untuk memeriksa apakah bakteriofag tertentu akan menunjukkan aktivitas terhadap perwakilan mikroflora, analisis harus dilakukan.

Bahan untuk penelitian ini adalah feses. Analisis harus dikirim ke laboratorium dalam waktu satu jam, jika tidak, analisis tidak akan dapat dilakukan. Analisis perlu dilakukan dalam beberapa kali pengulangan. Metode awal sama dengan metode untuk menentukan sensitivitas terhadap antibiotik. Pertama, dilakukan mikroskopi awal sampel, kemudian dilakukan penyemaian primer pada media nutrisi universal. Kemudian, kultur murni diisolasi pada media nutrisi selektif.

Pekerjaan utama dilakukan dengan kultur murni. Mereka diperlakukan dengan berbagai jenis bakteriofag. Jika koloni larut (lisis), ini menunjukkan aktivitas bakteriofag yang tinggi. Jika lisis bersifat parsial, bakteriofag berfungsi cukup baik. Jika tidak terjadi lisis, kita dapat berbicara tentang resistensi terhadap bakteriofag.

Keuntungan terapi fag adalah bakteriofag tidak memengaruhi tubuh manusia dan tidak menimbulkan efek samping. Bakteriofag menempel pada jenis bakteri tertentu dan melisiskannya. Kerugiannya adalah bakteriofag sangat spesifik dan memiliki efek selektif, serta tidak selalu dapat menempel pada bakteri.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Analisis dahak untuk sensitivitas antibiotik

Analisis merupakan studi tentang sekret yang keluar dari saluran pernapasan bagian bawah. Tujuannya adalah untuk menentukan jenis mikroorganisme yang berperan sebagai agen penyebab penyakit. Antibiogram juga dilakukan. Dalam hal ini, sensitivitas patogen terhadap antibiotik ditentukan, dan konsentrasi optimal dipilih. Antibiogram digunakan untuk penyakit saluran pernapasan.

Pemeriksaan dahak dan isi paru-paru dan bronkus lainnya diperlukan untuk memilih rejimen pengobatan dan untuk membedakan berbagai diagnosis. Pemeriksaan ini digunakan untuk mengonfirmasi atau menyangkal keberadaan tuberkulosis.

Pertama, perlu untuk mendapatkan bahan biologis. Bahan biologis dapat diperoleh dengan batuk, dengan ekspektorasi, atau dengan mengambilnya dari trakea selama bronkoskopi. Ada aerosol khusus yang mendorong ekspektorasi. Sebelum mengambil dahak, mulut harus dibilas dengan air, yang akan mengurangi tingkat kontaminasi bakteri pada rongga mulut. Pertama, dianjurkan untuk mengambil 3 napas dalam dan menghasilkan batuk yang produktif. Dahak juga dapat diambil dengan aspirasi dari trakea. Dalam hal ini, kateter khusus dimasukkan ke dalam trakea. Selama bronkoskopi, bronkoskop dimasukkan ke dalam rongga bronkial. Dalam hal ini, selaput lendir dilumasi dengan anestesi.

Bahan tersebut kemudian dikirim ke laboratorium untuk diuji. Penyemaian standar dan mikroskopi dilakukan. Kultur murni kemudian diisolasi dan manipulasi lebih lanjut dilakukan dengannya. Antibiogram dilakukan, yang memungkinkan untuk mengidentifikasi spektrum sensitivitas bakteri dan memilih dosis optimal.

Jika dicurigai tuberkulosis, dahak pagi diperiksa selama tiga hari. Bila dilakukan pemeriksaan tuberkulosis, hasilnya akan keluar dalam 3-4 minggu. Karena mycobacterium tuberculosis, yang merupakan agen penyebab penyakit, tumbuh sangat lambat.

Biasanya, perwakilan mikroflora normal saluran pernapasan harus dideteksi. Perlu juga diperhatikan bahwa dengan kekebalan yang berkurang, indikator mikroflora normal mungkin berbeda.

Analisis sperma untuk sensitivitas antibiotik

Ini adalah studi bakteriologis dari ejakulasi sperma dengan pemilihan antibiotik sensitif dan konsentrasinya selanjutnya. Paling sering dilakukan dalam pengobatan infertilitas dan penyakit lain pada sistem reproduksi pria. Dalam hal penyakit tersebut disertai dengan proses infeksi. Penyebab utama infertilitas pria dalam banyak kasus adalah infeksi. Biasanya, spermogram awalnya dilakukan. Berdasarkan hasilnya, kemampuan pembuahan sperma ditetapkan. Jika sejumlah besar leukosit ditemukan dalam analisis ini, kita dapat berbicara tentang proses inflamasi. Dalam hal ini, analisis mikrobiologis biasanya segera diresepkan, karena peradangan hampir selalu disertai dengan infeksi. Berdasarkan hasil yang diperoleh, terapi yang tepat dipilih. Studi ini biasanya diresepkan oleh seorang andrologis.

Prostatitis dan penyakit kelamin juga menjadi alasan dilakukannya analisis. Analisis ini juga diresepkan jika penyakit kelamin terdeteksi pada pasangan.

Dasar analisis yang benar adalah, pertama-tama, pengumpulan bahan biologis yang benar. Bahan dikumpulkan dalam wadah khusus dengan leher lebar. Suhu penyimpanan harus sesuai dengan suhu tubuh manusia. Dalam hal ini, bahan dapat disimpan tidak lebih dari satu jam. Dalam bentuk beku, dapat disimpan tidak lebih dari sehari. Tidak tepat untuk mengambil kultur selama asupan antibiotik, ini mengubah gambaran klinis. Biasanya, kultur diambil sebelum terapi antibiotik dimulai. Atau berhenti minum obat 2-3 hari sebelum analisis.

Kemudian disemai pada media nutrisi. Diinkubasi dalam termostat selama 1-2 hari. Setelah itu, kultur murni diisolasi, kemudian dilakukan identifikasi, ditentukan sensitivitasnya, serta jenis dan laju pertumbuhan setiap koloni. Kepekaan terhadap antibiotik ditentukan jika mikroorganisme patogen terdeteksi. Rata-rata, analisis memakan waktu 5-7 hari.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Tes sensitivitas gluten

Ada banyak tes yang dapat digunakan untuk menentukan sensitivitas imunologi terhadap berbagai zat atau patogen. Sebelumnya, metode utama adalah melakukan tes berdasarkan reaksi aglutinasi antibodi dan antigen. Saat ini, tes ini semakin jarang digunakan, karena sensitivitasnya jauh lebih rendah daripada banyak metode modern, seperti tes gluten. Paling sering, dalam praktiknya, mereka menggunakan tes air liur untuk analisis gluten dan tinja.

Tes sensitivitas gluten digunakan untuk mendiagnosis berbagai gangguan usus. Tes ini didasarkan pada reaksi sistem imun. Jika gluten ditambahkan ke tinja, reaksi terjadi atau tidak terjadi. Ini dianggap sebagai hasil positif palsu atau negatif palsu. Hasil positif menunjukkan kecenderungan kolitis, kemungkinan besar perkembangannya. Ini juga mengonfirmasi penyakit celiac.

Tes gluten juga dapat dilakukan dengan menggunakan air liur sebagai bahan biologis. Jumlah antibodi terhadap gliadin dapat diukur. Hasil positif menunjukkan sensitivitas terhadap gluten. Ini dapat mengindikasikan kemungkinan tinggi diabetes. Jika kedua tes positif, diabetes atau penyakit celiac dapat dipastikan.

[ 44 ], [ 45 ]

Tes sensitivitas klamidia terhadap antibiotik

Analisis dilakukan dalam pengobatan penyakit infeksi dan inflamasi pada saluran urogenital, jika diduga klamidia. Bahan untuk penelitian ini adalah kerokan dari mukosa vagina - pada wanita, apusan dari uretra - pada pria. Pengumpulan dilakukan di ruang prosedur menggunakan peralatan sekali pakai. Penting untuk menjaga kemandulan. Sebelum mengumpulkan bahan, Anda harus menahan diri dari keintiman selama 1-2 hari sebelum dimulainya penelitian. Jika seorang wanita sedang menstruasi, bahan dikumpulkan 3 hari setelah selesai sepenuhnya.

Bahan tersebut dikirim ke laboratorium. Analisis lengkap meliputi mikroskopi awal dari apusan. Hal ini memungkinkan untuk menentukan mikroflora secara visual berdasarkan ciri morfologi dan memilih media nutrisi dengan benar. Kandungan lendir, nanah, dan partikel epitel dapat secara langsung atau tidak langsung menunjukkan perkembangan proses inflamasi atau degenerasi sel ganas.

Kemudian, penyemaian primer dilakukan. Kultur diinkubasi selama beberapa hari dalam termostat, dan identifikasi dilakukan berdasarkan karakteristik kultur. Kemudian, kultur dipindahkan ke media nutrisi selektif yang ditujukan untuk membudidayakan klamidia. Koloni yang dihasilkan diidentifikasi menggunakan uji biokimia. Kemudian, sensitivitas terhadap antibiotik ditentukan menggunakan metode standar. Antibiotik yang paling sensitif dan konsentrasinya dipilih. Media khusus yang dikembangkan khusus untuk jenis mikroorganisme ini, yang mengandung semua zat dan faktor pertumbuhan yang diperlukan, diperlukan untuk membudidayakan klamidia.

Penelitian juga dapat dilakukan dengan metode biologis. Untuk melakukan ini, tikus diinfeksi dengan patogen. Di beberapa laboratorium, kultur jaringan yang ditumbuhkan secara khusus digunakan sebagai pengganti tikus. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa klamidia adalah parasit intraseluler, dan diperlukan kondisi khusus untuk budidayanya. Kemudian, mikroorganisme ditentukan menggunakan metode PCR. Untuk menentukan sensitivitas, mereka ditransplantasikan ke media nutrisi selektif untuk klamidia, dan setelah beberapa hari, hasilnya dicatat. Resistensi atau sensitivitas dinilai dari penekanan proses infeksi di dalam sel.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Berapa lama waktu yang dibutuhkan untuk melakukan uji sensitivitas antibiotik?

Rata-rata, analisis dilakukan dalam waktu 5-7 hari. Beberapa analisis memerlukan waktu lebih lama. Misalnya, saat mendiagnosis tuberkulosis, Anda harus menunggu dari 3 minggu hingga satu bulan untuk mendapatkan hasilnya. Semuanya tergantung pada tingkat pertumbuhan mikroorganisme. Sering kali, staf laboratorium harus menangani kasus-kasus ketika pasien meminta analisis dilakukan lebih cepat. Dan mereka bahkan menawarkan "pembayaran tambahan" untuk urgensi. Namun, di sini Anda perlu memahami bahwa dalam kasus ini, tidak ada yang bergantung pada tindakan asisten laboratorium. Itu hanya tergantung pada seberapa cepat mikroorganisme tumbuh. Setiap jenis memiliki tingkat pertumbuhannya sendiri yang ditentukan secara ketat.

Kinerja normal

Tidak ada nilai norma universal yang mutlak untuk semua analisis. Pertama, nilai-nilai ini mungkin berbeda untuk setiap biotop. Kedua, nilai-nilai tersebut bersifat individual untuk setiap mikroorganisme. Artinya, nilai norma untuk mikroorganisme yang sama, misalnya, untuk tenggorokan dan usus berbeda. Jadi, jika stafilokokus mendominasi di tenggorokan sebagai perwakilan mikroflora normal, maka E. coli, bifido- dan lactobacteria mendominasi di usus. Nilai-nilai untuk mikroorganisme yang sama dalam biotop yang berbeda mungkin juga berbeda secara signifikan. Misalnya, Candida biasanya dapat hadir dalam jumlah tertentu dalam mikroflora urogenital. Mereka biasanya tidak hadir di rongga mulut. Kehadiran Candida di rongga mulut dapat menunjukkan pengenalan buatan mereka dari habitat alami mereka.

Air seni, darah, cairan serebrospinal merupakan lingkungan biologis yang seharusnya steril, yaitu tidak mengandung mikroflora apa pun. Kehadiran mikroflora dalam cairan ini menunjukkan adanya proses peradangan dan infeksi yang kuat, dan juga menunjukkan risiko berkembangnya bakteremia dan sepsis.

Secara umum, ada klasifikasi perkiraan. Satuan ukur dalam mikrobiologi adalah CFU/ml, yaitu jumlah unit pembentuk koloni dalam 1 mililiter cairan biologis. Tingkat kontaminasi ditentukan oleh jumlah CFU dan bervariasi dalam rentang yang luas dari 10 ¹ hingga 10 ⁹. Dengan demikian, 10 ¹ adalah jumlah mikroorganisme minimum, 10 ⁹ adalah tingkat infeksi yang parah. Pada saat yang sama, kisaran hingga 10 ³ dianggap normal, semua indikator di atas angka ini menunjukkan reproduksi bakteri yang patologis.

Mengenai sensitivitas terhadap antibiotik, semua mikroorganisme dibagi menjadi resistan, agak sensitif, dan sensitif. Hasil ini sering dinyatakan sebagai karakteristik kualitatif yang menunjukkan MID - dosis penghambatan minimum antibiotik, yang masih menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Untuk setiap orang, serta untuk setiap mikroorganisme, indikator ini bersifat individual.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Perangkat untuk analisis

Saat melakukan penelitian bakteriologis, terutama dengan penentuan sensitivitas terhadap antibiotik, satu perangkat saja tidak akan cukup. Diperlukan peralatan laboratorium bakteriologis yang lengkap dan komprehensif. Perlu direncanakan dan dipilih secara cermat peralatan yang sesuai dengan setiap tahap penelitian. Pada tahap pengumpulan bahan biologis, diperlukan instrumen steril, kotak, wadah, ruang penyimpanan, dan peralatan transportasi untuk mengirimkan bahan ke laboratorium.

Di laboratorium, pertama-tama, Anda akan memerlukan mikroskop berkualitas tinggi untuk mikroskopi apusan. Saat ini, ada sejumlah besar mikroskop yang memiliki berbagai properti - dari mikroskop cahaya tradisional hingga mikroskop fase-kontras dan mikroskop gaya atom. Peralatan modern memungkinkan Anda memindai gambar dalam ruang tiga dimensi dan memeriksanya pada perbesaran tinggi dengan akurasi tinggi.

Pada tahap pembibitan dan inkubasi mikroorganisme, mungkin diperlukan autoklaf, lemari pemanas kering, desikator, penangas uap, dan sentrifus. Diperlukan termostat, tempat inkubasi utama bahan biologis berlangsung.

Pada tahap identifikasi mikroorganisme dan pelaksanaan antibiogram, mikromanipulator, spektrometer massa, spektrofotometer, kolorimeter mungkin diperlukan untuk berbagai perhitungan dan penilaian sifat biokimia kultur.

Selain itu, laboratorium modern dapat dilengkapi dengan peralatan berteknologi tinggi yang melakukan semua tahap utama penelitian yang disebutkan di atas, hingga menghitung hasil dalam mode otomatis. Perangkat tersebut mencakup, misalnya, perangkat kompleks laboratorium bakteriologi berdasarkan spektrometer massa waktu terbang. Lini perangkat ini memungkinkan untuk membagi seluruh wilayah laboratorium menjadi tiga zona. Zona pertama kotor, tempat tes diterima dan didaftarkan. Zona kedua adalah zona kerja, tempat penelitian mikrobiologi utama benar-benar dilakukan. Dan zona ketiga adalah sterilisasi dan autoklaf, tempat persiapan dan pembuangan bahan kerja dilakukan.

Model-model tersebut memungkinkan inkubasi pada berbagai suhu dan kondisi. Dilengkapi dengan alat analisis darah dan sampel biologis lainnya, yang menghasilkan hasil dengan akurasi dan keandalan tinggi. Kit ini mencakup timbangan elektronik, bidistiller, sentrifus, autoklaf dan lemari sterilisasi, pemasak medium otomatis, penangas air dengan pengaduk internal, pH meter, termometer, dan mikroskop.

Penganalisis mikrobiologi juga digunakan, yang di dalamnya sampel yang akan diuji, media nutrisi, dan serangkaian uji untuk menentukan sensitivitas ditempatkan. Perangkat tersebut melakukan studi yang diperlukan dan mengeluarkan kesimpulan yang siap pakai.

Meningkatkan dan menurunkan nilai

Hanya dokter yang dapat menguraikan analisis tersebut. Namun, sering kali pasien, setelah menerima hasilnya, panik, melihat sejumlah besar simbol dan angka yang tidak dapat dipahami. Agar tidak tersesat, disarankan untuk setidaknya memiliki gambaran umum tentang cara menguraikan analisis sensitivitas terhadap antibiotik. Biasanya, item pertama dalam hasil menunjukkan nama mikroorganisme yang menjadi agen penyebab penyakit. Nama tersebut diberikan dalam bahasa Latin. Itu juga dapat menunjukkan perwakilan dari mikroflora normal yang ada di dalam tubuh, jadi tidak perlu panik. Item kedua menunjukkan tingkat penyemaian, yaitu jumlah mikroorganisme. Biasanya, angka ini berkisar antara 10 ¹ hingga 10 ⁹. Item ketiga menunjukkan bentuk patogenisitas, dan yang keempat - nama obat antibakteri yang sensitif terhadap mikroorganisme ini. Konsentrasi penghambatan minimum, di mana pertumbuhan mikroorganisme ditekan, ditunjukkan di dekatnya.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]