Analisis mikroskopis dahak

Pemeriksaan mikroskopis terhadap sediaan dahak asli dan dahak tetap memungkinkan dilakukannya studi terperinci mengenai komposisi selulernya, dan sampai batas tertentu mencerminkan sifat proses patologis dalam paru-paru dan bronkus, aktivitasnya, untuk mengidentifikasi berbagai formasi berserat dan kristal, yang juga mempunyai nilai diagnostik penting, dan, akhirnya, untuk menilai secara kasar keadaan flora mikroba pada saluran pernapasan (bakterioskopi).

Mikroskopi menggunakan sediaan sputum asli dan yang diwarnai. Untuk mempelajari flora mikroba (bakterioskopi), apusan sputum biasanya diwarnai menurut Romanovsky-Giemsa, menurut Gram, dan untuk mengidentifikasi Mycobacterium tuberculosis menurut Ziehl-Neelsen.

Elemen seluler dan serat elastis

Dari unsur seluler yang dapat dideteksi dalam dahak penderita pneumonia, sel epitel, makrofag alveolar, leukosit dan eritrosit mempunyai nilai diagnostik.

Sel epitel. Epitel skuamosa dari rongga mulut, nasofaring, pita suara, dan epiglotis tidak memiliki nilai diagnostik, meskipun deteksi sejumlah besar sel epitel skuamosa, sebagai aturan, menunjukkan kualitas rendah sampel dahak yang dikirim ke laboratorium dan mengandung campuran air liur yang signifikan.

Pada pasien dengan pneumonia, dahak dianggap cocok untuk pemeriksaan jika, di bawah mikroskopi perbesaran rendah, jumlah sel epitel tidak melebihi 10 di bidang pandang. Jumlah sel epitel yang lebih banyak menunjukkan dominasi isi orofaring yang tidak dapat diterima dalam sampel biologis.

Makrofag alveolar, yang juga dapat ditemukan dalam jumlah kecil di dahak, adalah sel besar yang berasal dari retikulohistiosit dengan inti besar yang terletak eksentrik dan inklusi yang melimpah di sitoplasma. Inklusi ini dapat terdiri dari partikel debu kecil (sel debu) yang diserap oleh makrofag, leukosit, dll. Jumlah makrofag alveolar meningkat selama proses inflamasi di parenkim paru dan saluran pernapasan, termasuk pneumonia.

Sel epitel bersilia kolumnar melapisi selaput lendir laring, trakea, dan bronkus. Sel-sel ini tampak seperti sel memanjang, melebar di salah satu ujungnya, tempat nukleus dan silia berada. Sel epitel bersilia kolumnar ditemukan dalam dahak apa pun, tetapi peningkatannya menunjukkan kerusakan pada selaput lendir bronkus dan trakea (bronkitis akut dan kronis, bronkiektasis, trakeitis, radang tenggorokan).

Leukosit dalam jumlah kecil (2-5 di lapang pandang) ditemukan dalam dahak apa pun. Jika terjadi peradangan pada jaringan paru-paru atau selaput lendir bronkus dan trakea, terutama jika terjadi proses supuratif (gangren, abses paru, bronkiektasis), jumlahnya meningkat secara signifikan.

Saat mewarnai sediaan dahak menurut Romanovsky-Giemsa, dimungkinkan untuk membedakan leukosit individual, yang terkadang memiliki nilai diagnostik penting. Jadi, dengan peradangan parah pada jaringan paru-paru atau mukosa bronkial, jumlah total leukosit neutrofilik dan jumlah bentuk degeneratifnya dengan fragmentasi nuklei dan penghancuran sitoplasma meningkat.

Peningkatan jumlah bentuk leukosit degeneratif merupakan tanda terpenting dari aktivitas proses inflamasi dan perjalanan penyakit yang lebih parah.

Eritrosit. Eritrosit tunggal dapat ditemukan di hampir semua dahak. Peningkatan signifikan diamati dalam kasus gangguan permeabilitas vaskular pada pasien dengan pneumonia, dalam kasus kerusakan jaringan paru-paru atau bronkial, kongesti dalam sirkulasi paru, infark paru, dll. Eritrosit ditemukan dalam jumlah besar dalam dahak dalam kasus hemoptisis dari setiap genesis.

Serat elastis. Elemen lain dari dahak harus disebutkan - serat plastik, yang muncul dalam dahak selama kerusakan jaringan paru-paru (abses paru-paru, tuberkulosis, kanker paru-paru yang hancur, dll.). Serat elastis disajikan dalam dahak dalam bentuk benang tipis, berkontur ganda, terpilin dengan pembagian dikotomis di ujungnya. Munculnya serat elastis dalam dahak pada pasien dengan pneumonia berat menunjukkan terjadinya salah satu komplikasi penyakit - pembentukan abses jaringan paru-paru. Dalam beberapa kasus, ketika abses paru-paru terbentuk, serat elastis dalam dahak dapat dideteksi bahkan lebih awal daripada perubahan radiografi yang sesuai.

Seringkali, dalam kasus pneumonia lobaris, tuberkulosis, aktinomikosis, dan bronkitis fibrinosa, serat fibrin tipis dapat ditemukan dalam sediaan sputum.

Tanda-tanda proses peradangan aktif di paru-paru adalah:

1. sifat sputum (mukopurulen atau purulen);
2. peningkatan jumlah neutrofil dalam dahak, termasuk bentuk degeneratifnya;
3. peningkatan jumlah makrofag alveolar (dari kelompok tunggal beberapa sel dalam bidang pandang dan lebih banyak lagi);

Munculnya serat elastis dalam dahak menunjukkan rusaknya jaringan paru-paru dan terbentuknya abses paru-paru.

Kesimpulan akhir tentang keberadaan dan tingkat aktivitas peradangan dan kerusakan jaringan paru-paru terbentuk hanya jika dibandingkan dengan gambaran klinis penyakit dan hasil metode penelitian laboratorium dan instrumental lainnya.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

Flora mikroba

Mikroskopi apusan dahak yang diwarnai dengan Gram dan studi flora mikroba (bakterioskopi) pada beberapa pasien dengan pneumonia memungkinkan kita untuk menentukan secara perkiraan agen penyebab infeksi paru-paru yang paling mungkin. Metode diagnostik cepat agen penyebab yang sederhana ini tidak cukup akurat dan harus digunakan hanya dalam kombinasi dengan metode pemeriksaan dahak lainnya (mikrobiologis, imunologis). Mikroskopi imersi dari apusan dahak yang diwarnai terkadang sangat berguna untuk pemilihan darurat dan resep terapi antibakteri yang memadai. Namun, orang harus mengingat kemungkinan penyemaian isi bronkial dengan mikroflora saluran pernapasan atas dan rongga mulut, terutama jika dahak dikumpulkan dengan tidak benar.

Oleh karena itu, dahak dianggap layak untuk pemeriksaan lanjutan (pemeriksaan bakterioskopi dan mikrobiologi) hanya jika memenuhi syarat-syarat berikut:

• Pewarnaan Gram menunjukkan sejumlah besar neutrofil dalam dahak (lebih dari 25 di bidang pandang pada perbesaran mikroskop yang rendah);
• jumlah sel epitel, yang lebih merupakan ciri khas isi orofaring, tidak melebihi 10;
• sediaan mengandung dominasi mikroorganisme dari satu jenis morfologi.

Saat pewarnaan apusan dahak menurut Gram, terkadang dapat diidentifikasi pneumokokus gram positif, streptokokus, stafilokokus, dan sekelompok bakteri gram negatif - Klebsiella, basil Pfeiffer, Escherichia coli, dll. dengan cukup baik. Dalam hal ini, bakteri gram positif memperoleh warna biru, dan bakteri gram negatif - merah.

Patogen bakteri pada pneumonia

Gram positif	Gram negatif
Pneumokokus Streptokokus pneumoniae. Streptokokus Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Stafilokokus: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiella pneumoniae Haemophilus influenzae (Bacillus Pfeiffer) Haemophilius influenzae Bakteri Pseudomonas aeruginosa Pneumophilia legionella Bakteri Escherichia coli

Bakterioskopi sputum pendahuluan merupakan metode paling sederhana untuk memverifikasi agen penyebab pneumonia dan sangat penting untuk memilih terapi antibiotik yang optimal. Misalnya, jika diplokokus Gram-positif (pneumokokus) atau stafilokokus terdeteksi pada apusan yang diwarnai Gram, alih-alih antibiotik spektrum luas yang meningkatkan risiko pemilihan dan penyebaran mikroorganisme yang resistan terhadap antibiotik, terapi target yang aktif terhadap pneumokokus atau stafilokokus dapat diresepkan. Dalam kasus lain, deteksi flora Gram-negatif yang dominan pada apusan dapat menunjukkan bahwa agen penyebab pneumonia adalah enterobakteri Gram-negatif (Klebsiella, Escherichia coli, dll.), yang memerlukan penunjukan terapi target yang tepat.

Benar, kesimpulan kasar tentang kemungkinan agen penyebab infeksi paru-paru dapat dibuat dengan mikroskopi hanya berdasarkan peningkatan bakteri yang signifikan dalam dahak, pada konsentrasi 10 ⁶ - 10 ⁷ μl/ml dan lebih (LL Vishnyakova). Konsentrasi mikroorganisme yang rendah (< 10 ³ μl/ml) merupakan karakteristik mikroflora yang menyertainya. Jika konsentrasi badan mikroba berfluktuasi dari 10 ⁴ hingga 10 ⁶ μl/ml, ini tidak mengecualikan peran etiologi mikroorganisme ini dalam terjadinya infeksi paru-paru, tetapi juga tidak membuktikannya.

Perlu diingat juga bahwa patogen intraseluler "atipikal" (mycoplasma, legionella, chlamydia, rickettsia) tidak terwarnai menurut Gram. Dalam kasus ini, kecurigaan adanya infeksi "atipikal" dapat muncul jika disosiasi antara sejumlah besar neutrofil dan sejumlah kecil sel mikroba terdeteksi dalam apusan dahak.

Sayangnya, metode bakterioskopi secara umum memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang agak rendah. Nilai nonprediktif bahkan untuk pneumokokus yang tervisualisasi dengan baik hampir tidak mencapai 50%. Ini berarti bahwa dalam setengah kasus metode tersebut memberikan hasil positif palsu. Hal ini disebabkan oleh beberapa alasan, salah satunya adalah bahwa sekitar 1/3 pasien telah menerima antibiotik sebelum dirawat di rumah sakit, yang secara signifikan mengurangi efektivitas bakterioskopi dahak. Selain itu, bahkan dalam kasus hasil tes positif yang menunjukkan konsentrasi patogen bakteri "khas" yang cukup tinggi dalam apusan (misalnya pneumokokus), keberadaan koinfeksi dengan patogen intraseluler "atipikal" (mikoplasma, klamidia, legionella) tidak dapat sepenuhnya dikesampingkan.

Metode bakterioskopi dari apusan dahak yang diwarnai dengan Gram, dalam beberapa kasus membantu memverifikasi agen penyebab pneumonia, meskipun secara umum memiliki nilai prediktif yang sangat rendah. Patogen intraseluler "atipikal" (mycoplasma, legionella, chlamydia, rickettsia) tidak diverifikasi oleh bakterioskopi sama sekali, karena tidak diwarnai dengan Gram.

Perlu disebutkan kemungkinan diagnostik mikroskopis pada pasien dengan pneumonia akibat infeksi jamur pada paru-paru. Yang paling relevan bagi pasien yang menerima pengobatan jangka panjang dengan antibiotik spektrum luas adalah deteksi Candida albicans dalam bentuk sel mirip ragi dan miselium bercabang selama mikroskopi sediaan dahak asli atau yang diwarnai. Mereka menunjukkan perubahan mikroflora isi trakeobronkial, yang terjadi di bawah pengaruh pengobatan antibiotik, yang memerlukan koreksi terapi yang signifikan.

Dalam beberapa kasus, pasien dengan pneumonia perlu membedakan kerusakan paru-paru yang ada dari tuberkulosis. Untuk tujuan ini, pewarnaan apusan dahak menurut Ziehl-Neelsen digunakan, yang dalam beberapa kasus memungkinkan mengidentifikasi mikobakteri tuberkulosis, meskipun hasil negatif dari penelitian tersebut tidak berarti bahwa pasien tidak menderita tuberkulosis. Saat pewarnaan dahak menurut Ziehl-Neelsen, mikobakteri tuberkulosis diwarnai merah, dan semua elemen dahak lainnya diwarnai biru. Mikobakteri tuberkulosis memiliki tampilan batang tipis, lurus atau sedikit melengkung dengan panjang yang bervariasi dengan penebalan individual. Mereka terletak dalam sediaan secara berkelompok atau sendiri-sendiri. Deteksi bahkan mikobakteri tuberkulosis tunggal dalam sediaan memiliki nilai diagnostik.

Untuk meningkatkan efisiensi deteksi mikroskopis mikobakteri tuberkulosis, sejumlah metode tambahan digunakan. Yang paling umum adalah apa yang disebut metode flotasi, di mana dahak yang dihomogenkan dikocok dengan toluena, xilena atau bensin, yang tetesannya, mengambang, menangkap mikobakteri. Setelah dahak mengendap, lapisan atas dioleskan ke slide kaca dengan pipet. Preparat kemudian difiksasi dan diwarnai menurut Ziehl-Neelsen. Ada juga metode akumulasi (elektroforesis) dan mikroskopi bakteri tuberkulosis (mikroskop luminescent) lainnya.

Pemeriksaan mikroskopis (analisis) dahak memungkinkan mendeteksi lendir, unsur seluler, formasi fibrosa dan kristal, jamur, bakteri, dan parasit.

Sel

• Makrofag alveolar adalah sel yang berasal dari retikulohistiosit. Sejumlah besar makrofag dalam dahak terdeteksi dalam proses kronis dan pada tahap resolusi proses akut dalam sistem bronkopulmonalis. Makrofag alveolar yang mengandung hemosiderin ("sel cacat jantung") terdeteksi pada infark paru, perdarahan, dan kongesti dalam sirkulasi paru. Makrofag dengan tetesan lipid merupakan tanda adanya proses obstruktif di bronkus dan bronkiolus.
• Sel xantomatosa (makrofag lemak) ditemukan pada abses, aktinomikosis, dan ekinokokosis paru-paru.
• Sel epitel bersilia kolumnar merupakan sel selaput lendir laring, trakea, dan bronkus. Sel-sel ini ditemukan pada bronkitis, trakeitis, asma bronkial, dan neoplasma ganas paru-paru.
• Epitel datar terdeteksi ketika air liur memasuki dahak dan tidak memiliki nilai diagnostik.
• Leukosit hadir dalam setiap dahak dalam jumlah yang bervariasi. Sejumlah besar neutrofil ditemukan dalam dahak mukopurulen dan purulen. Dahak kaya akan eosinofil dalam kasus asma bronkial, pneumonia eosinofilik, lesi paru cacing, dan infark paru. Eosinofil dapat muncul dalam dahak dalam kasus tuberkulosis dan kanker paru. Limfosit ditemukan dalam jumlah besar dalam kasus batuk rejan dan, lebih jarang, tuberkulosis.
• Sel darah merah. Deteksi sel darah merah tunggal dalam dahak tidak memiliki nilai diagnostik. Jika darah segar hadir dalam dahak, sel darah merah yang tidak berubah terdeteksi, tetapi jika darah yang telah berada di saluran pernapasan untuk waktu yang lama dikeluarkan bersama dahak, sel darah merah yang terlarut terdeteksi.
• Sel tumor ganas ditemukan pada neoplasma ganas.

Serat

• Serat elastis muncul selama disintegrasi jaringan paru-paru, yang disertai dengan penghancuran lapisan epitel dan pelepasan serat elastis; mereka ditemukan pada tuberkulosis, abses, echinococcosis, dan neoplasma di paru-paru.
• Serat berbentuk koral ditemukan pada penyakit paru-paru kronis seperti tuberkulosis kavernosa.
• Serat elastis yang terkalsifikasi adalah serat elastis yang diresapi dengan garam kalsium. Deteksinya dalam dahak merupakan ciri khas disintegrasi petrifikasi tuberkulosis.

Spiral, kristal

• Spiral Kurshman terbentuk dalam kasus kondisi kejang bronkus dan adanya lendir di dalamnya. Selama batuk, lendir kental dibuang ke lumen bronkus yang lebih besar, berputar menjadi spiral. Spiral Kurshman muncul pada asma bronkial, bronkitis, tumor paru-paru yang menekan bronkus.
• Kristal Charcot-Leyden merupakan produk pemecahan eosinofil. Kristal ini biasanya muncul dalam dahak yang mengandung eosinofil; kristal ini merupakan ciri khas asma bronkial, kondisi alergi, infiltrat eosinofilik di paru-paru, dan cacing paru.
• Kristal kolesterol muncul dalam abses, echinococcosis paru, dan neoplasma di paru-paru.
• Kristal hematoidin merupakan ciri khas abses paru-paru dan gangren.
• Drusen aktinomiset ditemukan pada aktinomikosis paru.
• Unsur-unsur echinococcus muncul pada echinococcosis paru.
• Sumbat Dietrich adalah gumpalan abu-abu kekuningan dengan bau yang tidak sedap. Sumbat ini terdiri dari detritus, bakteri, asam lemak, dan tetesan lemak. Sumbat ini merupakan ciri khas abses paru dan bronkiektasis.
• Tetrad Ehrlich terdiri dari empat elemen: detritus yang mengalami kalsifikasi, serat elastis yang mengalami kalsifikasi, kristal kolesterol, dan mikobakteri tuberkulosis. Tetrad ini muncul selama pembusukan lesi tuberkulosis primer yang mengalami kalsifikasi.

Miselium dan sel jamur yang bertunas muncul selama infeksi jamur pada sistem bronkopulmonalis.

Bakteri Pneumocystis muncul pada Pneumocystis pneumonia.

Spherules jamur terdeteksi pada koksidioidomikosis paru-paru.

Larva Ascaris terdeteksi pada askariasis.

Larva cacing belut ditemukan pada strongiloidiasis.

Telur cacing paru terdeteksi selama paragonimiasis.

Unsur-unsur yang ditemukan dalam dahak pada asma bronkial. Pada asma bronkial, sejumlah kecil dahak kental dan berlendir biasanya disekresikan. Secara makroskopis, spiral Curschmann dapat terlihat. Pemeriksaan mikroskopis biasanya menunjukkan eosinofil, epitel silindris, dan kristal Charcot-Leyden.