Tes urease 13c: persiapan, hasil, positif, negatif

Sejak ditemukannya bakteri Helicobacter pylori yang dikaitkan dengan gastritis kronis serta tukak lambung dan duodenum, metode diagnostik telah dikembangkan, termasuk uji urease, yang memungkinkan pendeteksian mikroorganisme ini pada pasien tertentu, mengonfirmasi keterlibatannya dalam perkembangan penyakit gastrointestinal, serta meresepkan pengobatan yang efektif.

Enzim urease sebagai biomarker infeksi Helicobacter

Bakteri H. pylori melindungi diri dari lingkungan asam di lumen lambung dengan dua cara. Pertama, dengan merusak selaput lendir dengan flagelanya, mikroorganisme mencapai lapisan bawahnya, hingga ke sel epitel, yang pH-nya lebih tinggi (dengan kata lain, keasamannya lebih rendah). Kedua, bakteri menetralkan asam dengan mensintesis sejumlah besar metalloenzim urease atau urea amidohidrolase yang aktif secara katalitik.

Penggunaan urease dalam diagnosis Helicobacter dimungkinkan tidak hanya karena aktivitas sitoplasma enzim ini, tetapi juga karena interaksi eksternal dengan sel inang.

Di bawah aksi urease, terjadi pemecahan urea lambung menjadi hidrogen nitrida (amonia) dan karbon dioksida (karbon dioksida). Keduanya bereaksi dengan asam klorida dalam cairan lambung dan menghasilkan zona keasaman netral di sekitar H. pylori, dan juga mendukung metabolisme sel bakteri.

Itulah sebabnya urease merupakan faktor terpenting dalam kolonisasi H. pylori di mukosa lambung manusia, dan deteksi aktivitas ureolitik dianggap sebagai biomarker virulensi bakteri ini, yang oleh para ahli gastroenterologi – melalui uji urease – digunakan untuk mendiagnosis infeksi Helicobacter, sekaligus memantau hasil penghancuran (pemberantasan) bakteri yang diinduksi oleh obat.

Diagnostik H. pylori mencakup tes invasif dan non-invasif – tergantung pada apakah pemeriksaan endoskopi lambung (fibrogastroduodenoskopi) diperlukan atau tidak. Tes invasif adalah tes urease cepat atau tes urease cepat (tes RUT), yang memerlukan pengambilan sampel jaringan (biopsi). Tes napas urea 13C (13C-UBT) adalah tes non-invasif yang paling umum.

Perlu dicatat bahwa diagnostik non-invasif H.pylori dapat dilakukan dengan menggunakan tes darah untuk antibodi (spesifisitas pada tingkat 75%, sensitivitas - 84%), ELISA urin (dengan sensitivitas 96% dan spesifisitas 79%), dan koprogram untuk antigen bakteri. Informasi lebih lanjut - Infeksi Helicobacter pylori: antibodi terhadap Helicobacter pylori dalam darah

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Indikasi untuk prosedur ini Uji urease

Kolonisasi mukosa lambung oleh H. pylori sendiri bukanlah suatu penyakit; melainkan merupakan faktor peningkatan beban bakteri pada tubuh, yang dalam kondisi tertentu dapat memicu perkembangan sejumlah patologi lambung dan saluran cerna bagian atas.

Indikasi untuk diagnosis infeksi Helicobacter, khususnya, uji urease, dikaitkan dengan gastritis dengan peningkatan keasaman, gastritis antral dan atrofi, duodenitis, tukak lambung dan tukak duodenum, limfoma MALT lambung. Setelah reseksi endoskopi kanker lambung stadium awal, pemeriksaan histologis dapat dilakukan dalam kombinasi dengan uji urease cepat - FGDS dengan uji urease.

Dokter spesialis gastroenterologi mungkin akan menyarankan pemeriksaan urease apabila pasien mengeluhkan adanya rasa berat dan tidak nyaman di daerah epigastrium, sering mengalami nyeri ulu hati setelah makan, sendawa asam atau busuk, rasa pahit di mulut, mual, gangguan usus, serta nyeri atau kram di lambung.

[ 8 ], [ 9 ]

Persiapan

Persiapan untuk uji napas urea 13C meliputi penghentian pasien: mengonsumsi antibiotik 4 minggu sebelum uji, dan NSAID, penghambat pompa proton (mengurangi keasaman lambung) dan antasida atau penyerap yang digunakan untuk sakit maag - setidaknya dua minggu sebelumnya. Mengonsumsi obat apa pun harus dihentikan lima hingga enam hari, dan minum alkohol serta merokok - tiga hari sebelum uji.

Dianjurkan juga untuk menghindari makan kacang-kacangan selama sekitar seminggu sebelum pengujian, karena kacang, kacang polong, lentil, kacang kedelai dan buncis mengandung urease (yang melindungi tanaman dari penyakit dan hama serangga).

Malam sebelum ujian, makan malam berat yang terlambat tidak dianjurkan; pada hari ujian, Anda harus menjaga kebersihan mulut seperti biasa, dan satu setengah jam sebelum ujian, Anda tidak boleh minum apa pun atau menggunakan permen karet.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Teknik Uji urease

Teknik pelaksanaan:

• Pertama, sampel pernapasan dasar diambil - hembusan napas dilakukan ke dalam wadah plastik lunak (dan ditutup rapat);
• cairan dengan tambahan 13C-urea diminum secara oral;
• Setelah 25-30 menit, sampel kedua udara yang dihembuskan diambil ke wadah lain.

Sampel yang diperoleh dengan cara ini dianalisis pada spektrometer massa dengan pemisahan isotop pada sampel kedua dan penentuan konsentrasinya. Selisih antara nilai pada sampel kedua dan pertama dinyatakan sebagai delta (δ) dibandingkan dengan kadar awal. Nilai normal, yaitu nilai negatif atom berlabel 13C pada pasien yang tidak terinfeksi bervariasi dari 0,15-0,46%, dan nilai positif pada adanya infeksi adalah 1,2-9,5% dengan laju hidrolisis urea lebih dari 12-14 μg/menit.

Sederhananya: terdeteksinya karbon dioksida berlabel 13C di udara yang dihembuskan menunjukkan bahwa urea telah dihidrolisis oleh enzim urease H. pylori, yang pada kenyataannya, mengonfirmasi fakta keberadaannya di lambung.

Tes napas H.pylori

Tes 13C-UBT atau tes napas urea 13C untuk Helicobacter pylori adalah salah satu metode non-invasif terpenting untuk mendeteksi infeksi ini: dengan sensitivitas 100% dan spesifisitas 98%, risiko hasil positif palsu dan hasil negatif palsu dibandingkan dengan pengujian histologi dan antibodi darah adalah 2,3% lebih rendah.

Analisis didasarkan pada hidrolisis urea cair yang diberikan secara oral berlabel atom karbon (isotop non-radioaktif stabil) 13C (50-75 mg 13C-urea yang diencerkan dalam 100 ml cairan) oleh urease H. pylori.

Urea yang diberi label dengan indikator isotop mengalami hidrolisis di lambung dengan pelepasan amonia dan karbon dioksida yang mengandung atom berlabel, yang berdifusi ke dalam darah dan dikeluarkan dari paru-paru selama bernapas. Karbon dioksida berlabel direkam oleh perangkat analitis - spektrometer massa, yang pengoperasiannya didasarkan pada spektroskopi selektif isotop non-dispersif, atau penganalisis spektroskopi inframerah.

Tes urease cepat

Rapid Urease Test (RUT) dilakukan selama pemeriksaan endoskopi lambung dan duodenum - menggunakan endofibroskop modern - dan pengambilan sampel biopsi secara bersamaan. Biomaterial seharusnya diambil dari bagian antral lambung. Jadi fibrogastroduodenoskopi atau FGDS dengan uji urease merupakan metode diagnostik invasif.

Biopsi yang diperoleh direndam seluruhnya dalam media standar yang telah disiapkan berisi gel agar, urea, indikator asam-basa fenolsulfophthalmein dan agen bakteriostatik (ditambahkan untuk mencegah pertumbuhan mikroorganisme kontaminan dan hasil positif palsu).

Jika bakteri H. pylori terdapat dalam sampel jaringan lambung, urease yang dihasilkannya akan menghidrolisis urea dan menaikkan pH, yang terlihat jelas saat indikator berubah dari kuning menjadi jingga (pada pH 6,8) dan ungu (pada pH > 8). Sebanyak 75% hasil tes positif berubah warna dalam waktu 120-180 menit, dan semakin cepat indikator berubah warna, semakin banyak jumlah bakterinya. Namun, hasil tes yang tampak negatif disimpan selama 24 jam.

Rapid Urease Test Positif, Apa Artinya? Tes RUT positif – indikator berubah menjadi merah – berarti sampel biopsi yang ditempatkan di media agar mengandung sedikitnya 105 bakteri H. pylori, meskipun konsentrasinya biasanya lebih tinggi.

Sensitivitas berbagai modifikasi tes bervariasi dalam kisaran 90-98%, dan spesifisitas – 97-99%.

Seperti yang dicatat oleh ahli gastroenterologi, jika kesimpulan pasien menunjukkan uji urease positif tajam (tiga tanda silang), ini berarti: pH> 8, dan indikator berubah warna dalam waktu kurang dari 60 menit sejak biopsi direndam, yang menunjukkan sejumlah besar H.pylori dan tingkat ekspresi urease yang tinggi. Perkiraan jumlah bakteri dapat dihitung selama pemeriksaan histologis biopsi di bawah mikroskop, dan jika melebihi 40-50 di area yang terlihat, tingkat infeksi dianggap tinggi.

Tes napas urea 13C jarang memberikan hasil positif palsu, dan pada pasien dengan dugaan tukak lambung atau duodenum, satu tes positif dipertimbangkan untuk mengonfirmasi diagnosis, sedangkan hasil negatif harus dikonfirmasi oleh EGD dengan tes urea.